林业科学

作者：李伟,其其格,黄旭,岳阳,尹靖琨,王瑞俭*

单位：北华大学林学院 吉林 132013

关键词：越桔属,蓝莓,栽培品种,DNA条形码,遗传分化

基金：吉林省重点科技研发项目(20180201005NY);国家林业局测试指南编制项目(2015009)

目的: 筛选出适合鉴别蓝莓品种的DNA条形码，用于蓝莓不同品种的区分及遗传分化研究。方法: 以40个蓝莓品种108份样品总DNA为模板，对8个条形码片段（rpoB、psbA-trnH、ycf5、rbcL、rpoC、matK、ITS、ITS2）进行扩增与测序，分析扩增效率及测序成功率、遗传距离、barcoding gap，并对遗传距离计算结果进行Wilcoxon检验，利用NJ树法对各蓝莓品种进行聚类分析。结果: 在8个DNA条形码中，ITS与ycf5在所有蓝莓样本中均无扩增产物。除matK序列扩增成功率（96.30%）、测序成功率（99.04%）相对较低外，其他5个条形码扩增与测序成功率均为100%。蓝莓的rpoB序列完全一致，为高度保守序列。各条形码的变异位点数依次为：ITS2（11个）> matK（4个）> rbcL（3个）> psbA-trnH（2个）> rpoC（1个）> rpoB（0个）。各蓝莓品种的品种内、品种间遗传距离较小，介于0.000 16~0.002 58之间，且品种间遗传距离大于品种内。Barcoding gap分析结果显示，各条形码均未形成明显的间隔区，但从分布情况看，ITS2、psbA-trnH、matK 3个条形码有偏向两端分布的趋势，尤其是ITS2。Wilcoxon检验显示，ITS2、psbA-trnH品种间变异较大，psbA-trnH品种内的变异较大。聚类分析结果表明，psbA-trnH和rpoC可将蓝莓品种分为2个类群，rbcL和matK将蓝莓划分为3个类群，ITS2将蓝莓分为4个类群。利用条形码组合可提高蓝莓品种鉴定率，其中ITS2+matK+rpoC+rbcL鉴定成功率最高，为20%。结论: ITS2对蓝莓品种的鉴定结果优于其他条形码，条形码组合ITS2+matK+rpoC+rbcL将40个蓝莓品种分为14组，能够将山东省主要的蓝莓栽培品种如伯克利、阳光蓝、北陆等品种区分开来，较适于蓝莓的品种鉴定。

来源：2019年第12期

《林业科学》期刊编辑部

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