林业科学

作者：高亚兰,何苑皋,李河*

单位：南方人工林病虫害防控国家林业和草原局重点实验室 森林有害生物防控湖南省重点实验室 经济林培育与保护省部共建教育部重点实验室 中南林业科技大学 长沙 410004

关键词：油茶,果生刺盘孢菌,bZIP转录因子,CfAp1,致病力

基金：湖南省自然科学基金项目(2019JJ40531);中南林业科技大学大学生科技创新基金(2018-10)

目的: 研究油茶炭疽病的主要流行致病菌果生刺盘孢菌bZIP转录因子CfAp1的生物学功能，以期阐明果生刺盘孢菌致病的分子机制，为油茶炭疽病的防治提供理论依据。方法: 提取果生刺盘孢菌全基因组DNA，根据同源重组原理构建CfAP1基因敲除载体片段，采用PEG介导法把该片段转化至果生刺盘孢菌野生型菌株的原生质体中，验证筛选突变体菌株；PCR扩增果生刺盘孢菌含有启动子的CfAP1基因回补片段，构建回补载体pYF11：：CfAP1；采用PEG介导法把回补载体pYF11：：CfAP1转化至果生刺盘孢菌突变体菌株的原生质体中，获得回补菌株ΔCfap1/AP1。测定野生型菌株、突变体菌株ΔCfap1-8及基因回补菌株ΔCfap1/AP1在生长发育、附着胞形成、外界胁迫和致病力等生物学表型。结果: 果生刺盘孢菌中具有1个与灰色大角间座壳（稻瘟菌）bZIP转录因子MoAp1直系同源的基因，命名为CfAP1；该基因全长1 804 bp，编码566个氨基酸，该蛋白含有1个碱性亮氨酸链（bZIP）结构域、2个PAP1结构域和2个未知功能的结构域；与野生型和回补菌株相比，突变体ΔCfap1-8生长速率没有明显影响，但气生菌丝显著减少；通过测量产孢量，发现突变体ΔCfap1-8的分生孢子显著减少；ΔCfap1-8在含2.5、5 mmol·L-1 H2O2和0.7 mol·L-1NaCl的PDA平板上菌丝生长受到明显抑制；致病力测试结果表明，果生刺盘孢菌基因敲除突变体ΔCfap1-8对无伤和有伤油茶叶片的致病力下降明显，与野生型和回补菌株的致病力差异显著；突变体分生孢子产生附着胞数量减少且膨压降低。结论: 转录因子CfAp1参与调控油茶果生刺盘孢菌的生长发育、产孢、致病力以及响应外界氧压胁迫和渗透压胁迫过程。

来源：2020年第9期

《林业科学》期刊编辑部

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