林业科学

作者：韩昆瑾,郭娟娟,吕梓晴,李玉言,王世杰,杨敏生,王进茂*

单位：河北农业大学林学院 河北省林木种质资源与森林保护重点实验室 保定 071001

关键词：107杨,Bt基因')">Bt基因,多基因转化,基因表达,抗虫性

基金：国家林业和草原局科技发展中心项目(KJZXZH202001);转基因生物新品种培育重大专项(2018ZX08020002)

目的: 探索转多基因107杨外源基因是否稳定存在且表达，筛选对鳞翅目和鞘翅目害虫具双抗性的转基因株系，为培育转多基因抗虫杨树新品种提供有价值的参考。方法: 对107杨转Cry1Ac-Cry3A-BADH基因的3个株系（ECAA1-3）和转Cry1Ac-Cry3A-NTHK1基因的3个株系（ECAB1-3）的2年生田间苗进行PCR检测、毒蛋白含量检测和抗虫性检测。结果: PCR凝胶电泳检测证明目的基因仍在转多基因107杨的基因组中；转多基因107杨Bt毒蛋白检测证明，8月份各转基因株系均含有Cry1Ac和Cry3A毒蛋白，Cry1Ac毒蛋白含量为3.60~20.76 ng·g-1，Cry3A毒蛋白含量为3 479.66~7 230.29 ng·g-1。室内饲虫试验证明，转多基因107杨具有双抗性，对美国白蛾和柳蓝叶甲幼虫均表现出抗性，其中株系ECAB1对美国白蛾的致死率最高，为100%，株系ECAA1、ECAA2和ECAA3对美国白蛾1龄幼虫具有明显抑制其生长发育的作用；除转基因株系ECAA2外，其他株系均表现为对柳蓝叶甲高抗虫性，对1龄幼虫的致死率均达到100%，对1、2龄混龄幼虫的致死率均在85%~100%之间，对成虫致死率在66%以上。结论: 转多基因107杨各株系的外源基因仍存在且稳定表达，其抗虫性与非转基因对照相比均有显著提高，但不同转基因株系间差异显著，株系ECAA3和ECAB1对美国白蛾和柳蓝叶甲幼虫均具有较高抗虫性。

来源：2021年第11期

《林业科学》期刊编辑部

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