林业科学

作者：王霞,曹银珠,武华峰,刘道凤,眭顺照*

单位：西南大学园艺园林学院　长江上游农业生物安全与绿色生产教育部重点实验室　长重庆市花卉工程技术研究中心　重庆 400715

关键词：蜡梅,BBX,逆境胁迫,转基因

基金：国家自然科学基金面上项目（31971711）；国家自然科学青年基金项目（32101575）。

目的: BBX (B-box) 是锌指结构蛋白转录因子家族中一个重要的亚家族，在植物生长发育、植物信号转导及逆境胁迫响应中具有重要的调控作用。对蜡梅BBX24基因的克隆与分析，有利于丰富植物中对BBX基因家族的认识，为蜡梅抗逆调节机制提供新的理论依据。方法: 以蜡梅转录组数据库中获得的蜡梅CpBBX24基因cDNA序列为基础克隆基因全长，使用DNAStar 和MEGA进行序列分析和进化树构建。采用qRT-PCR进行蜡梅不同组织及不同花期表达特性分析，以及ABA、MeJA、干旱、高盐、高温和低温等处理后表达分析。同时，使用Gateway技术构建植物表达载体，花絮侵染法转化拟南芥，对T3代纯合系进行表型观察及非生物胁迫耐性分析。结果: 获得CpBBX24的cDNA序列长为1374 bp，包含729 bp 的开放阅读框（ORF），编码242个氨基酸，分子量为26.54 kD，等电点为4.93。序列分析表明CpBBX24蛋白在N端有两个串联的B-box结构域，其C端不包含CCT结构域。表达特性分析表明，CpBBX24在蜡梅根、茎、子叶、幼叶、成熟叶各器官，外瓣、内瓣、雌蕊、雄蕊等组织中均有表达，其中在子叶中表达量最高。在不同开花时期，CpBBX24表达呈波动变化，在衰老期表达量最高。ABA、MeJA、干旱、高盐、高温和低温均能诱导CpBBX24基因的表达，表达趋势各有差异。在PEG（30% PEG-6000）、高盐（300 mmol·L?1 NaCl）、高温（42 ℃）、低温（4 ℃）胁迫下，转基因拟南芥处理后植株总体生长状态优于野生型，相对电导率和丙二醛浓度数值显著低于野生型，说明CpBBX24基因过表达增强了拟南芥的干旱、高盐、高温及低温胁迫耐性。结论: ABA、MeJA、干旱、高盐、高温和低温等处理诱导了CpBBX24的表达，说明其可能参与蜡梅的逆境胁迫耐性调控。CpBBX24的过表达增强了拟南芥的干旱、高盐、高温及低温等胁迫耐性。这些结果表明 CpBBX24 基因在干旱、高盐、低温和高温等胁迫响应中发挥重要作用。

来源：2024年第4期

《林业科学》期刊编辑部

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