国内刊号:11-1908/S
国际刊号:1001-7488
发布日期:
作者:张漪曼,路龙俊,张毓婷,杨琪,韩潇,童再康,张俊红*
单位:浙江农林大学 省部共建亚热带森林培育国家重点实验室 杭州 311300
关键词:闽楠,紫色酸性磷酸酶,低磷胁迫,基因家族,无机磷含量
基金:浙江省农业新品种选育重大科技专项(2021C02070-10)。
目的: 紫色酸性磷酸酶(PAPs)是应对低磷胁迫的重要酸性磷酸酶,筛选响应低磷胁迫的闽楠PAPs基因,并进行功能验证,探究闽楠适应低磷胁迫下的响应机制,为培育闽楠磷高效利用种质提供理论依据。方法: 基于闽楠全基因组数据,通过blastp同源比对及hmmersearch对闽楠PAPs基因家族进行鉴定及生信分析,与拟南芥和挪威云杉PAPs蛋白序列比对,构建系统进化树。通过对闽楠2个家系(靖安3号和宜丰5号)苗在不同磷含量(0 mmol·L?1 KH2PO4和1 mmol·L?1 KH2PO4)处理下的光合荧光参数、无机磷含量、酸性磷酸酶(ACP)活性及PAPs表达量进行分析,筛选了3个PbPAPs进行后续基因功能研究。结果: 在闽楠全基因组中鉴定到22个PbPAPs基因,均含有Metallophos结构域,不均匀分布于10条染色体,氨基酸长度326~648 aa,大部分基因等电点小于7,外显子数量2~13个,共有2对串联重复和4对片段重复,系统进化树分为3组。低磷胁迫下2个家系苗主根伸长抑制,根毛密度和根表面积增加;净光合速率和Fv/Fm值均显著下降,而ACP活性显著升高;靖安3号叶片无机磷含量先下降后有所上升,宜丰5号变化较平稳,靖安3号处理7天后根无机磷含量显著下降,宜丰5号处理21天根无机磷含量显著下降,而处理后期变化趋势相近。经RT-qPCR分析,低磷诱导PbPAP10a、PbPAP15a和PbPAP26基因表达。分别通过发根农杆菌和根癌农杆菌介导遗传转化获得PbPAP10a、PbPAP15a和PbPAP26基因的过表达闽楠根系及转基因拟南芥,其ACP活性显著增强,无机磷含量显著升高,表明过表达PbPAPs基因可提高ACP活性和无机磷含量。结论: 闽楠对低磷胁迫有较高耐受性,且宜丰5号比靖安3号对低磷胁迫的耐受性更高,适用于瘠薄林地或酸性低磷林地造林,过表达闽楠PAPs基因可提高ACP活性和无机磷含量,助力于闽楠对低磷环境的适应性。
来源:2025年第5期
《林业科学》期刊编辑部