林业科学

作者：焦阳,王深,曾智新,乔静,余浩森,张琦琦,邱明萱,潘怡宁,舒文波*

单位：果蔬园艺作物种质创新与利用全国重点实验室　华中农业大学　武汉 430070

关键词：84K杨,分离鉴定,脱菌,变温黑暗处理,茎尖培养

基金：国家重点研发计划（2023YFD2200202）；湖北省大学生创新训练计划项目（S202410504140）；华中农业大学2024年大学生科技创新基金（SRF）项目（2024SRF085）。

目的: 对感染菌的84K杨组培苗菌株进行分离鉴定，并探索一种高效、简便的组培苗脱菌技术，为木本植物扩繁、长期继代保存、植物抗逆性、生长活力和高效稳定遗传转化体系的维持提供技术保障。方法: 以感染菌的84K杨组培苗为材料，利用16S rDNA测序结合NCBI-BLAST搜索对菌株进行分离鉴定。通过比较0.1%氯化汞、无菌水培、黑暗、变温黑暗等处理，并结合取茎尖培养法对感染菌的84K杨组培苗进行脱菌处理。进一步对比脱菌前后愈伤诱导成芽试验，评估脱菌效果。结果: 感染菌的84K杨组培苗有3种细菌（84K-01、84K-02、84K-03），其中84K-01与短小杆菌属一种（CP066341.1）相似度达99.79%，84K-02与威廉姆斯菌属一种（JQ660098.1）相似度达99.93%，84K-03与藤黄杆菌属一种（CP077072.1）相似度达99.86%；0.1%氯化汞、单独黑暗21天和变温黑暗21天处理结合取茎尖培养法对84K杨组培苗３种细菌均具有显著脱菌效果（P<0.05），而变温黑暗21天处理结合取茎尖培养法综合效果最优，无菌率达51.85%。对脱菌84K杨进行愈伤诱导和成芽能力分析，发现脱菌苗叶片诱导的愈伤生长更快，且能成芽。结论: 感染菌的84K杨组培苗分离鉴定出3种细菌，变温黑暗21天处理结合取茎尖培养法去除效果最佳。这套方法以其简便、快捷、稳定性高、无毒害性等优点，可在感染菌的木本植物组培苗脱菌中推广应用。

来源：2025年第8期

《林业科学》期刊编辑部

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